闺蜜和我被黑人4p到惨,免费a级毛片无码免费视频120软件,里番acg里番成人本子,年轻的护士3韩国三级

網(wǎng)站首頁技術(shù)中心 > Annexin V-Alexa Fluor 647/PI 凋亡檢測
產(chǎn)品目錄
Annexin V-Alexa Fluor 647/PI 凋亡檢測
更新時間:2021-02-22 點擊量:2039

                                                                                                                    

Annexin V-Alexa Fluor 647/PI 凋亡檢測試劑盒說明書

Annexin V-Alexa Fluor 647/PI Apoptosis Detection Kit 

 

貨號:K2577     

保存:2-8  ℃避光保存 

 

組分說明

 

Cat.No.                    K2577

KitSize                     50

4×BindingBuffer            10ml

PropidiumIodide,PI          500 μl

AnnexinV-AlexaFluor647    250 μl

 

產(chǎn)品簡介 

 

   AnnexinV-AlexaFluor647/PI 凋亡檢測試劑盒是一種采用AnnexinV-AlexaFluor647 與 PI 雙染法進行細胞早期凋亡分析的檢測試劑盒。

   細胞凋亡早期改變發(fā)生在細胞膜表面,這些細胞膜表面的改變之一是磷脂酰絲氨酸(PS)從細胞膜內(nèi)轉(zhuǎn)移到細胞膜外,使  PS 暴露在細胞膜外表面。PS 是一種帶負電荷的磷脂,正常主要存在于細胞膜的內(nèi)面,在細胞發(fā)生凋亡時細胞膜上的這種磷脂分布的不對稱性被破壞而使PS 暴露在細胞膜外。Annexin V 具有易于結(jié)合到磷脂類如PS 的特性,對PS 有高度的親和性。因此,該蛋白可充當一敏感的探針檢測暴露在細胞膜表面的PS。PS 轉(zhuǎn)移到細胞膜外不是凋亡所*的,也可發(fā)生在細胞壞死中。兩種細胞死亡方式間的差別是在凋亡的初始階段細胞膜是完好的,而細胞壞死在其早期階段細胞膜的完整性就被破壞。另外一種活細胞非透過性熒光染料碘化丙啶(PropidiumIodide,PI)不能通過完整的活細胞,但能夠?qū)乃篮偷蛲鐾砥诘募毎M行染色,因此通常將AnnexinV 與PI 配合染色,以區(qū)別凋亡早期細胞與壞死細胞和凋亡的晚期細胞。

 

注意事項 

 

1.  消化細胞時不能用含EDTA 的胰酶。 

2.  本試劑盒需使用流式細胞儀進行檢測。

3.  需自備PBS 和去離子水。

4.  熒光染料均存在淬滅問題,保存和使用過程中請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。

5.  PI 對人體有刺激性,請注意適當防護。

6.  請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

操作步驟 

 

1. 細胞樣品的準備:

 

    a. 對于貼壁細胞:小心收集細胞培養(yǎng)液到一離心管內(nèi)備用。用胰酶消化細胞,至細胞可以被輕輕用移液管或槍頭吹打下來時,加入前面收集的細胞培養(yǎng)液,吹打下所有的貼壁細胞,并輕輕吹散細胞。再次收集到離心管內(nèi)。1000×g 左右離心3-5 分鐘,沉淀細胞。對于特定的細胞,如果細胞沉淀不充分,可以適當延長離心時間或稍稍加大離心力。小心吸除上清,可以殘留約50 μl 左右的培養(yǎng)液,以避免吸走細胞。加入約1 ml 4℃預冷的    PBS,重懸細胞,再次離心沉淀細胞,小心吸除上清。再次加入1ml4℃預冷的 PBS,重懸細胞,再次離心沉淀細胞。

    b. 對于懸浮細胞:1000×g 左右離心3-5 分鐘,沉淀細胞。對于特定的細胞,如果細胞沉淀不充分,可以適當延長離心時間或稍稍加大離心力。小心吸除上清,可以殘留約                            50 微升左右的培養(yǎng)液,以避免吸走細胞。加入約 1 ml 4℃預冷的PBS,重懸細胞,并轉(zhuǎn)移到1.5 毫升離心管內(nèi)。再次離心沉淀細胞,小心吸除上清,可以殘留約                                50μl 左右的   PBS,以避免吸走細胞。再次加入1ml4℃預冷的PBS,重懸細胞,再次離心沉淀細胞。

2.  用去離子水按1:4 稀釋  BindingBuffer(4mlBindingBuffer+12ml 去離子水);

3.  用 250μlBindingBuffer 重新懸浮細胞,調(diào)節(jié)其濃度為1×106/ml;

4.  取100μl 的細胞懸液于5ml 流式管中,加入5μlAnnexinV/AlexaFluor647 和  10μl20μg/ml 的 PI 溶液;

5.  混勻后于室溫避光孵育15 分鐘;

6.  在反應管中加400μlPBS,流式細胞儀(FACS)分析。

    

實驗代做服務(wù):

ELISA試劑盒免費代檢測

CCK8檢測

HE染色

蛋白相互作用分析

Western Blot

免疫組化IHC染色

熒光定量PCR

動物模型服務(wù)

流式細胞檢測

免疫熒光染色

激光共聚焦

DNA甲基化實驗

石蠟/冰凍切片

透射電鏡服務(wù)

掃描電鏡實驗

蛋白雙向(2-D)

動物實驗

免疫共沉淀

原位雜交(FIsh

蛋白質(zhì)純化

分子克隆和質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)

組蛋白甲基化磷酸化乙?;?/a>

 

蛋白雙向2D-WB

 

藥理毒理動物實驗

 

番紅O固綠染色

明膠酶譜MMP

酶活性檢測

動物造模/模型實驗服務(wù)

滬公網(wǎng)安備 31011802001677號

对白荡伦系列之子你不能这样我 | 供人泄欲玩弄的妓女h| 免费看又黄又无码的网站| 无套内谢少妇毛片a片999| 白洁一晚挨十二炮| 精品人伦一区二区三区蜜桃| 全是肉肉的说说| 爱上黑道女友| 欧洲精品99毛片免费高清观看| 男人日女人| 成人a片99产无码小视频| 精品精品国产高清a级毛片| 一女三男做2爱a片免费| 午夜精品久久久久久久无码| 第一次处破女18分钟高清| 波多野结衣绝顶大高潮| 白嫩白嫩bbwbbwbbw| 免费真人视频网站直播下载 | 人妻无码| 极度性变态另类扩张| 97成人无码免费一区二区中文| 日韩吃奶摸下aa片免费观看| 色88久久久久高潮综合影院 | 日本一区二区三区| 白洁新婚之夜第一章| 蜜桃视频app下载直播| 日韩+国产| 国产亚洲精品aaaa片小说| 三上悠亚ssni绝顶を教え込ま| 人善交videos欧美3d| 富豪们的玩物np全肉小说| gogo全球专业高清摄影| 人妻熟人中文字幕一区二区| 回民丰满少妇xxx性| 两个黑人大战嫩白金发美女| 军人全身脱精光自慰| 国产伦精品一区二区三区免费迷| 潘金莲全集1一5集正版| 你的奶好大让老子摸摸的说说 | 欧美乱妇日本无乱码特黄大片| 精品乱子伦一区二区三区|