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蛋白質(zhì)純化實(shí)驗(yàn)服務(wù)

蛋白質(zhì)純化實(shí)驗(yàn)服務(wù)

產(chǎn)品型號(hào):

所屬分類:蛋白質(zhì)組學(xué)實(shí)驗(yàn)

產(chǎn)品時(shí)間:2024-08-18

簡(jiǎn)要描述:提供商:上海研謹(jǐn)生物
服務(wù)名稱:蛋白質(zhì)純化實(shí)驗(yàn)服務(wù)
規(guī)格:實(shí)驗(yàn)服務(wù)
周期:4-6周
價(jià)格: 500元
收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果:
歡迎咨詢?cè)斦?,我們?huì)根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。
更多實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)請(qǐng)瀏覽網(wǎng)站其他內(nèi)容,或來(lái)電詳詢!

詳細(xì)說(shuō)明:

蛋白質(zhì)純化實(shí)驗(yàn)服務(wù)

蛋白質(zhì)純化簡(jiǎn)介:

蛋白純化要利用不同蛋白間內(nèi)在的相似性與差異,利用各種蛋白間的相似性來(lái)除去非蛋白物質(zhì)的污染,而利用各蛋白質(zhì)的差異將目的蛋白從其他蛋白中純化出來(lái)。每種蛋白間的大小形狀、電荷、疏水性、溶解度和生物學(xué)活性都會(huì)有差異,利用這些差異可將蛋白從混合物如大腸桿菌裂解物中提取出來(lái)得到重組蛋白。

蛋白質(zhì)純化的實(shí)驗(yàn)方法:

蛋白的純化大致分為粗分離階段和精細(xì)純化階段二個(gè)階段。般蛋白純化采用的方法為樹(shù)脂法。粗分離階段主要將目的蛋白和其他細(xì)胞成分如DNA、RNA等分開(kāi),由于此時(shí)樣本體積大.成分雜,要求所用的樹(shù)脂高容量、高流速、顆粒大、粒徑分布寬.并可以迅速將蛋白與污染物分開(kāi),必要時(shí)可加入相應(yīng)的保護(hù)劑(例如蛋白酶抑制劑)。防止目的蛋白被降解。精細(xì)純化階段則需要更高的分辨率,此階段是要把目的蛋白與那些分子量大小及理化性質(zhì)接近的蛋白區(qū)分開(kāi)來(lái),要用更小的樹(shù)脂顆粒以提高分辨率,常用離子交換柱和疏水柱,應(yīng)用時(shí)要綜合考慮樹(shù)脂的選擇性和柱效兩個(gè)因素。選擇性指樹(shù)脂與目的蛋白結(jié)

的特異性,柱效則是指各蛋白成分逐個(gè)從樹(shù)脂上集中洗脫的能力,洗脫峰越窄,柱效越好。僅有好的選擇性,洗脫峰太寬,蛋白照樣不能有效分離。

蛋白的表達(dá):

是指通過(guò)模式生物來(lái)表達(dá)目的的外源基因蛋白的一種現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù),表達(dá)系統(tǒng)主要是由宿主、外源基因、載體和輔助成分組成,從而實(shí)現(xiàn)外源基因通過(guò)載體在宿主中的表達(dá)。

實(shí)驗(yàn)意義:

1.蛋白表達(dá)技術(shù)在基因工程技術(shù)中占有核心地位,在實(shí)際生產(chǎn)中具有重要的應(yīng)用意義。

2.蛋白表達(dá)技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于生物學(xué)各個(gè)具體領(lǐng)域,特別是體內(nèi)的功能研究和蛋白質(zhì)的大規(guī)模生產(chǎn)都需要應(yīng)用。

實(shí)驗(yàn)原理:

1.獲得目的基因;

2.構(gòu)建合適的載體(注意根據(jù)目的基因和純化方式的選擇等多方面因素選擇融合標(biāo)簽) ;

3.將目的基因插入表達(dá)載體中。并通過(guò)測(cè)序進(jìn)行驗(yàn)證:

4.載體轉(zhuǎn)化進(jìn)入大腸桿菌等宿主菌后,測(cè)序篩選挑單克隆菌落進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),IPTG誘導(dǎo)靶蛋白的表達(dá);

5.破碎菌體后提取蛋白。并通過(guò)融合標(biāo)簽純化得到靶蛋白。

分類:

1.真核表達(dá)系統(tǒng):真核表達(dá)系統(tǒng)主要有昆蟲(chóng)表達(dá)系統(tǒng)、酵母表達(dá)系統(tǒng)和哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá),其中酵母表達(dá)和哺乳動(dòng)物細(xì)胞較為常見(jiàn)。

2.無(wú)細(xì)胞體外表達(dá)系統(tǒng),又稱為體外翻譯系統(tǒng),通過(guò)模擬細(xì)胞的生命活動(dòng)和現(xiàn)象來(lái)重現(xiàn)胞內(nèi)蛋白的轉(zhuǎn)錄和翻譯過(guò)程。

結(jié)果展示:

原核表達(dá)系統(tǒng)

真核表達(dá)系統(tǒng)



無(wú)細(xì)胞體外表達(dá)系統(tǒng)

Reaction temperature (C)

實(shí)驗(yàn)周期及交付標(biāo)準(zhǔn):

1.實(shí)驗(yàn)周期: 4-6周

2.交付標(biāo)準(zhǔn):目的蛋白、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(試劑、 耗材、實(shí)驗(yàn)步驟)、原始數(shù)據(jù)等。

需確認(rèn)的信息:

1.表達(dá)系統(tǒng)采取方式。

2.純化步驟選擇。


實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

ELISA試劑盒免費(fèi)代檢測(cè)

CCK8檢測(cè)

基因組DNA提取


蛋白相互作用分析

Western Blot

免疫組化

熒光定量PCR

動(dòng)物模型服務(wù)

流式細(xì)胞檢測(cè)

ROS氧化分析

激光共聚焦

DNA甲基化實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞劃痕

鈣離子濃度檢測(cè)

掃描電鏡實(shí)驗(yàn)

microRNA測(cè)序

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

探針合成

ATP/ADP檢測(cè)

石蠟/冰凍切片

定點(diǎn)突變

線粒體膜電位(MMP)檢測(cè)

細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的測(cè)定

藥理毒理動(dòng)物實(shí)驗(yàn)


免疫共沉淀

真核表達(dá)載體構(gòu)建

染色質(zhì)免疫沉淀CHIP

非標(biāo)定量(Label-free)實(shí)驗(yàn)




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  • 服務(wù)熱線:
  • 400-665-0203
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